Patch-Clamp Applications and Protocols

E. Neher e B. Sakman furono i primi a monitorare l'apertura e la chiusura di singoli canali ionici nelle membrane attraverso misurazioni di conducibilità. Nel 1976, utilizzarono micropipette a punta lucidata con un diametro di 3-5 micrometri per registrare correnti da una piccola area della membrana dei muscoli scheletrici, riducendo così il rumore di fondo della membrana. Per ridurre la principale fonte di rumore di fondo - la corrente di perdita sotto il bordo della pipetta tra la membrana muscolare e il vetro - era necessario un trattamento enzimatico della membrana. Nonostante queste prime limitazioni, nacque una nuova tecnica: la tecnica del patch-clamp. La svolta avvenne nel 1981, quando gli stessi autori, in collaborazione con O. P. Hamill, A. Marty e F. J. Sigworth, svilupparono il principio della tenuta in Gigaohm. Questo non solo migliorò la qualità delle registrazioni, ma rese anche possibile staccare delicatamente il patch di membrana dalla cellula con la pipetta attaccata.