Patch-Clamp Applications and Protocols

E. Neher et B. Sakman furent les premiers à surveiller l'ouverture et la fermeture de canaux ioniques individuels dans les membranes par des mesures de conductivité. En 1976, ils utilisèrent des micropipettes polies au feu avec un diamètre de pointe de 3 à 5 micromètres pour enregistrer des courants d'une petite zone de la membrane des muscles squelettiques, réduisant ainsi le bruit de fond de la membrane. Pour diminuer la source dominante du bruit de fond – le courant de fuite sous le bord de la pipette entre la membrane musculaire et le verre – un traitement enzymatique de la membrane était nécessaire. Malgré ces premières limitations, une nouvelle technique vit le jour : la technique du patch-clamp. La percée survint en 1981, lorsque les mêmes auteurs, en collaboration avec O. P. Hamill, A. Marty et F. J. Sigworth, développèrent le principe de l'étanchéité en gigaohms. Cela améliora non seulement la qualité des enregistrements, mais permit également de retirer délicatement le patch de membrane avec la pipette attachée de la cellule.